酵素結合免疫吸附法對豬瘟抗體、抗原之檢測及應用

出版年份: 
2002年
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摘要: 

在我國以LPC疫苗免疫及對豬瘟抗體之監控,為加強豬場豬瘟自衛防疫之重點,但由於血清中和抗體檢測法耗時耗力。因此本研究之目的,乃藉由比較四種市售豬瘟抗體ELISA檢測套組與中和抗體間之相關性,進而評估應用於豬瘟免疫接種適期之預測及血清監控之可行性。在試驗中,首先以簡單直線迴歸分析比較不同END血清中和抗體力價與CHEKIT®、IDEXX®、Ceditest® 及CivtestTM 四種豬瘟抗體ELISA檢測套組之相關性,檢測之結果相係數r值分別為0.892、0.863、0.795及0.766,其中以CHEKIT® ELISA抗體力價與中和抗體力價相關性最高。因此,進一步利用CHEKIT® ELISA檢測套組分析台中、彰化及南投縣20個豬場中,呈現免疫反應正常豬場 (陽性率≧80%) 之上市肉豬 (n=300) 血清ELISA抗體力價 (% of value),抗體平均力價為104.553 ±32.418%,此可作為正常上市肉豬經LPC免疫後抗體力價之參考值。進而以ELISA法評估仔豬移行抗體對於LPC疫苗免疫之干擾現象,其結果顯示,如將豬隻LPC疫苗免疫前以CHEKIT® ELISA所測得之抗體力價,區分為≦30%、31-60%、61-90%、91-110及≧111% 五區間,在經LPC疫苗一次免疫後6週,血清抗體轉陽率分別是100%、84.6%、77.7%、30.56%及0%,此顯示當CHEKIT® ELISA抗體力價≧90%時,對於LPC疫苗之免疫,則具有約50%之干擾現象。另外以ELISA法監控潛在豬瘟污染場中高豬瘟抗體力價豬隻之實驗中,結果亦顯示血清經20倍稀釋後再以CHEKIT® ELISA套組檢測,可有效區分高ELISA抗體力價介於130-160%間之LPC疫苗正常免疫豬隻 (48.43 ±13.22%) 及豬瘟病毒感染耐過豬隻之血清 (105.00 ±13.60%),因此血清樣品經20倍釋稀後,若ELISA抗體力價≧80%時,則可懷疑曾遭受豬瘟病毒之潛在感染。本實驗中亦利用自然豬瘟感染豬隻,進行各種抗原檢測方法之比較,評估各種抗原檢測法之適用性,以配合抗體ELISA對豬瘟進行監控。實驗結果顯示,在急性豬瘟感染場,病毒分離、RT-PCR及豬瘟抗原ELISA均可應用作為本病之診斷;而在慢性豬瘟感染場,則以病毒分離及RT-PCR檢測較為適宜。綜合以上結果顯示豬瘟抗體檢測在blocking ELISA與中和抗體檢測間具有相關性,可應用於大量豬瘟血清抗體監測、豬場免疫計劃評估及豬場是否遭受野外病毒污染之監控上。